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Tipo do documento: Dissertação
Título: O código transcricional gerado pelo cérebro sob influência de diferenciais dietários durante o desenvolvimento do sistema nervoso de Apis mellifera
Autor: FREIRE, Anna Cláudia Guimarães 
Primeiro orientador: BARCHUK, Angel Roberto
Primeiro membro da banca: NUNES, Francis de Morais Franco
Segundo membro da banca: SANTOS, Maria José Campagnole
Resumo: A diferenciação morfofisiológica observada entre as fêmeas Apis mellifera é decorrente dos diferentes regimes alimentares experimentados durante o período larval. Os diferenciais dietários desencadeiam complexas cascatas de reações endócrinas, conduzindo ao estabelecimento de diferentes redes de expressão gênica. O resultado é a diferenciação de castas, rainhas e operárias, a partir de genótipos aparentemente idênticos. O tamanho do cérebro em relação ao do corpo representa uma das principais diferenças fenotípicas entre rainhas e operárias. Operárias adultas apresentam o cérebro proporcionalmente mais desenvolvido em relação às rainhas. Entretanto, o inverso é observado durante o desenvolvimento larval, período no qual as rainhas apresentam cérebros maiores, provavelmente, em resposta ao diferencial nutricional. Assim, nosso objetivo foi identificar mediadores moleculares que respondem ao diferencial alimentar, conduzindo ao maior desenvolvimento do cérebro em rainhas durante o período larval. Para tanto, foram dissecados cérebros de larvas de rainhas e operárias. O RNA total dos cérebros foi utilizado para a síntese de cDNA, a partir do qual foi sintetizado aRNA marcado com fluoróforos diferenciados. Este foi hibridado em lâminas de microarray de oligonucleotídeos correspondentes a todos os genes conhecidos do genoma de A. mellifera. Após a obtenção e quantificação das imagens de hibridação, os transcritos diferencialmente representados (TDR) foram selecionados através de normalização e análises estatísticas sendo, então, analisados in silico. As análises mostraram 16 TDRs entre o cérebro das castas, sendo que 12 são mais abundantes em rainhas e quatro, em operárias. Os produtos dos transcritos mais representados nas primeiras estão relacionados à proliferação, fasciculação e conexão neural. Em operárias, os produtos dos genes mais transcritos atuam, principalmente, no desenvolvimento de células dos olhos e de neurônios GABAérgicos. PCRq do gene GlcAT-P (um TDR) mostrou que seus níveis de transcrição são maiores em cérebro de rainhas durante todo o período de desenvolvimento larval estudado (L3-L5), corroborando, assim, os dados dos microarrays. Os produtos codificados pelos TDR encontrados neste trabalho, atuando juntos, podem ser responsáveis por mediar a ação nutricional sobre a morfogênese do cérebro em castas A. mellifera.
Abstract: The morphophysiological differentiation observed among Apis mellifera females is due to the different diets experienced during the larval period, which trigger complex cascades of endocrine reactions, leading to the establishment of different gene expression networks, thus giving rise to two very different morphs, queens and workers, from seemingly identical genotypes. The brain area/body size ratio represents a major phenotypic difference between queens and workers. Adult workers have proportionally more developed brains than queens. However, the opposite is observed during the larval period, in which queens have larger brains, probably in response to differential nutrition. Thus, our objective was to identify molecular mediators responding to the larval differential feeding, leading to the more developed brain of queens. Larval brains were dissected, and their total RNAs were used for cDNA synthesis, from which was synthesized aRNA marked with different fluorophores. These labeled RNAs were hybridized to oligonucleotide microarray slides corresponding to all known genes of the A. mellifera genome. After obtaining images and quantification of hybridization, the differentially represented transcripts (DRT) were selected through normalization and statistical analyzes, and studied in silico. There were found 16 DRT in the brain of A. mellifera queens and workers at L4, 12 up-regulated in queens and 4 in workers. Considering predicted functions, or demonstrated in other biological systems, the up-regulated transcript products in queens are associated with cell proliferation, fasciculation and interneuronal connections processes. In workers, the over-represented gene products act mainly on the eye cells and GABAergic neurons development, thus allowing adult activities like navigation, foraging, and nestmate recognition. qPCR of the gene GlcAT-P (a DRT) showed that its transcription levels are higher in queens’ brain during the whole larval period (L3-L5), thus confirming microarray results. The products encoded by the DRTs found in this work, acting together, may be responsible for mediating the nutritional influence on brain morphogenesis in A. mellifera castes.
Palavras-chave: Neurogênese
Expressão gênica
Alimentação diferencial
Abelhas
Área(s) do CNPq: FISIOLOGIA DE ORGAOS E SISTEMAS::FISIOLOGIA ENDOCRINA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Federal de Alfenas
Sigla da instituição: UNIFAL-MG
Departamento: Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação
Programa: Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas
Citação: FREIRE, Anna Cláudia Guimarães. O código transcricional gerado pelo cérebro sob influência de diferenciais dietários durante o desenvolvimento do sistema nervoso de Apis mellifera. 2012. 96 f. Dissertação (Mestado em Ciências Fisiológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2012.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
Endereço da licença: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
URI: https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1421
Data de defesa: 23-Fev-2012
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