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dc.creatorSOUZA, Gabriel Augusto Pires de-
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/7888980121374299por
dc.contributor.advisor1COELHO, Luiz Felipe Leomil-
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/9770069078554162por
dc.contributor.referee1CAMPOS, Rafael Kroon-
dc.contributor.referee2CALDAS, Ivo Santana-
dc.date.accessioned2020-02-13T18:20:28Z-
dc.date.issued2019-01-25-
dc.identifier.citationSOUZA, Gabriel Augusto Pires de. Avaliação de plataformas vacinais experimentais contra o Zika virus utilizando nanopartículas de albumina sérica bovina. 2019. 59 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2019.por
dc.identifier.urihttps://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1536-
dc.description.resumoO Zika virus (ZIKV) é considerado um Flavivirus emergente e foi associado a epidemias em ilhas na região do Oceano Pacífico e em vários países das Américas. Paralelemente, manifestações graves como a microcefalia e síndrome de Guillain- Barré tiveram a sua incidência aumentada durante estes surtos e contribuíram para o estabelecimento de um estado de emergência pela Organização Mundial da Saúde (OMS). A partir de então, o desenvolvimento de uma vacina eficaz para prevenir infecções causadas pelo ZIKV tornou-se uma prioridade, uma vez que não há vacinas para o ZIKV em estágios avançados de desenvolvimento, o que, fortalece a necessidade de testar plataformas alternativas. Estudos preliminares do nosso grupo mostraram que as nanopartículas de albumina sérica bovina são sistemas promissores de vacinas para antígenos microbianos. Portanto, devido à falta de vacinas disponíveis para o ZIKV e aos resultados anteriormente obtidos pelo nosso grupo, este estudo teve como objetivo caracterizar e avaliar a capacidade de nanopartículas de albumina sérica bovina (BSA-NPs) associadas ao vírus inativado em induzir a produção de anticorpos específicos contra o ZIKV Ensaios in vitro foram realizados para avaliar a citotoxicidade da formulação e também para avaliar a taxa de interiorização de nanopartículas por célula permissiva ao ZIKV. Finalmente, os animais foram imunizados com as nanopartículas contendo ZIKV inativado encapsulado (NPZ) ou uma mistura composta de BSA-NPs e ZIKV (NP+ZIKV). Anticorpos IgG anti-ZIKV produzidos foram mensurados no soro dos animais imunizados por ELISA. Os resultados indicam que a plataforma nanométrica NPZ possui morfologia esférica irregular de 226.1 ± 3.4 nm de diâmetro e -15.9 ± 1.0 mV de carga superficial. A detecção de genoma de viral em NPZ indica a presença do encapsulamento do ZIKV nas nanopartículas, com porcentagem de eficiência média de encapsulamento de 96%. Ensaios in vitro mostram que as nanopartículas foram interiorizadas pelas células VERO, sem qualquer citotoxicidade significativa. Camundongos imunizados com NPZ não demonstraram produção significativa de anticorpos IgG totais específicos, enquanto o grupo de animais imunizados com NP+ZIKV mostraram uma produção significativa de IgG total e IgG1 anti-ZIKV em relação aos animais imunizados apenas com o ZIKV inativado. Os dados evidenciam o potencial adjuvante das BSA-NPs na elaboração de uma vacina eficaz contra o ZIKV. Futuros estudos deverão ser conduzidos para determinar se os anticorpos produzidos possuem ação neutralizante e se estes anticorpos são capazes de proteger animais susceptíveis da infecção pelo ZIKV.por
dc.description.abstractZika virus (ZIKV) is an emerging Flavivirus that has caused epidemic outbreaks in islands in the Pacific region and several countries of the Americas. In parallel, severe manifestations such as microcephaly and Guillain-Barré syndrome have increased in incidence during the ZIKV outbreak. This scenario contributed to the establishment of a state of emergency by the World Health Organization (WHO). Therefore, finding an effective vaccine to prevent ZIKV infections is a priority, since there are no vaccines for ZIKV in advanced stages of development. This strengthens the need to test alternative vaccine platforms to prevent ZIKV infections. Preliminary studies from our group have been showed that bovine serum albumin nanoparticles are promising systems for delivery microbial antigens. Therefore, due to the lack of available vaccines for ZIKV and results previously obtained by our group, this study aims to evaluate if bovine serum albumin nanoparticles (BSA-NPs) associated to inactivated ZIKV are able to induce the production of specific antibodies against the virus. In vitro assays were performed to evaluate the cytotoxicity of the formulation and also to evaluate the uptake rate of nanoparticles by permissive cells. Finally, mice were immunized with the nanoparticles containing encapsulated ZIKV (NPZ) or immunized with BSA-NPs mixed with inactivated ZIKV (NP+ZIKV). Anti-ZIKV IgG antibodies were measured in the blood of immunized animals by ELISA. The results indicate that NPZ nanometer platform has 226.1 ± 3.4 nm in diameter and -15.9 ± 1.0 mV of surface charge. Electron Scanning Microscopy indicates that this nanoparticle has an irregular spherical morphology. Detection of the viral genome in nanoparticles suggests the presence of ZIKV in the formulation and a high percentage of encapsulation efficiency (96%). The nanoparticles are uptaken by VERO cells, without any significant cytotoxicity. Mice immunized with nanoparticles containing encapsulated ZIKV (NPZ) did not show substantial output of total IgG antibodies against ZIKV. In contrast, mice immunized with inactivated ZIKV mixed with BSA nanoparticles (NP+ZIKV) showed a significant production of anti-ZIKV antibodies (Total IgG and IgG1). The data strengths the adjuvant potential of BSA-NPs in the elaboration of an effective vaccine against ZIKV. However, Future studies should be performed to determine whether the produced antibodies have neutralizing action and if these antibodies can protect susceptible animals to ZIKV infectioneng
dc.description.provenanceSubmitted by Marlom César da Silva (marlom.silva@unifal-mg.edu.br) on 2020-02-13T18:19:44Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de Gabriel Augusto Pires de Souza.pdf: 1655799 bytes, checksum: c9b8712503dd538e7c5491c05d0e2900 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
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dc.description.sponsorshipPrograma Institucional de Bolsas de Pós-Graduação - PIB-PÓSpor
dc.formatapplication/pdf*
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Alfenaspor
dc.publisher.departmentPró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduaçãopor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.initialsUNIFAL-MGpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Ciências Biológicaspor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/-
dc.subjectVirus da Denguepor
dc.subjectAlbumina Séricapor
dc.subjectVacinaspor
dc.subjectNanopartículaspor
dc.subject.cnpqCIENCIAS BIOLOGICASpor
dc.titleAvaliação de plataformas vacinais experimentais contra o Zika virus utilizando nanopartículas de albumina sérica bovinapor
dc.typeDissertaçãopor
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