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dc.creatorSALLES, Évila da Silva Lopes-
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/5207180496349657por
dc.contributor.advisor1PAFFARO JUNIOR, Valdemar Antonio-
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/4193402330362099por
dc.contributor.referee1PAIVA, Alexandre Giusti-
dc.contributor.referee2HOSHIDA, Mara Sandra-
dc.contributor.referee3COELHO, Luiz Felipe Leomil-
dc.contributor.referee4CORAT, Marcus Alexandre Finzi-
dc.date.accessioned2020-02-17T11:57:11Z-
dc.date.available2021-02-20por
dc.date.issued2019-07-02-
dc.identifier.citationSALLES, Évila da Silva Lopes. Dieta hiperlipídica provoca alterações fenotípicas e funcionais no útero das gerações parental e F1 prenhes. 2019. 155 f. Tese (Doutorado em Ciências Fisiológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2019.por
dc.identifier.urihttps://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1542-
dc.description.resumoAtualmente sabe-se que obesidade e o consumo de dieta rica em gordura estão relacionados a falha reprodutiva e ao evento de programação fetal e acredita-se que as células imunológicas presentes no útero gravídico possam estar relacionadas a estes eventos. Dentre as células imunes uterinas destaca-se a atividade das Células Linfóides Inatas (uILC), em especial as células uNK DBA+. Essas células são como sentinelas da interface maternofetal, pois são capazes de reconhecer e responder às mais variadas alterações do organismo materno, além de terem papel importante nos processos de decidualização, implantação e formação da placenta. A hipótese deste trabalho é que o consumo de dieta hiperlipidica (HL) durante a gestação possa afetar o ambiente uterino e a biologia das células uNK, além de promover o evento de programação fetal resultando na alteração do ambiente uterino e das células uNK da geração F1 prenhe. Para a realização deste estudo foram utilizadas 90 fêmeas de camundongos Swiss, as quais acasalaram com machos da mesma linhagem. Na manhã após acasalamento, as fêmeas que apresentaram tampão vaginal foram divididas em 2 grandes grupos os quais consumiram as dietas do 1° dia de gestação (ddg) ao momento da eutanásia: MRC (mães com ração controle) e MHL (mães com ração HL). 45 fêmeas MRC e 45 fêmeas MHL foram eutanasiadas no 6°, 10° e 14° ddg. Foram realizadas análises de ganho de peso, área de tecido adiposo perigonadal, viabilidade gestacional, morfologia e estereologia das células uNK, imunofluorescência para perforina e caspase-3 clivada, análise de expressão gênica de perforina, granzima B, Ly49A, Ly49B, interferon gama (IFNγ), Fator de crescimento endotelial vascular α (VEGFα), Fator de necrose tumoral α (TNFα), Toll Like receptor 4 (TLR4), Interleucina- 1β (IL-1β), Fator transformador de crescimento (TGF-β1), Interleucina-17a (IL-17a) e Supressor da sinalização de citocina 3 (SOCS 3) na decídua basal uterina e análise das uILC por citometria de fluxo. Foram também utilizadas 12 fêmeas MRC e 12 MHL que consumiram a dieta durante toda a gestação para dar origem as proles controle (F1RC) e HL (F1HL). No 2° dia pós-natal (DPN) as proles foram padronizadas em 8 a 10 filhotes, sendo o número de fêmeas sempre igual ao número de machos, e foi realizado também o procedimento de fostering (adoção). Foi analisado o ganho de peso e comprimento naso-anal das fêmeas F1 do 2° ao 60°DPN em dias alternados. A partir dos 60°DPN as fêmeas foram acasaladas com machos não parentais e eutanasiadas no 10°ddg. As fêmeas F1 prenhes foram avaliadas quanto ao ganho de peso durante a gestação, viabilidade gestacional, morfologia e estereologia das células uNK, imunofluorescência para perforina e caspase 3-clivada e análise de expressão de perforina na decídua materna. Os resultados mostraram que o grupo MHL teve ganho de peso e aumento da área do tecido adiposo significativos, foram encontradas na decídua dessas fêmeas células uNK DBAlow nas 3 regiões dos SI no 10° e 14°ddg, bem como, grânulos não reativos ao anti-perforina e aumento na incidência de células positivas para caspase 3-clivada. Foi observado também aumento na expressão de perforina e granzima e redução na expressão de Ly49A, IFNγ, IL-1β e IL-17a no 6°ddg. No 14°ddg houve diminuição na expressão de VEGFα, TNFα, TGF -β1 e SOCS 3. No grupo F1HL ocorreu redução do crescimento pós-natal e aumento do índice de Lee no 60°DPN. Foi observado também aumento significativo do peso e da área média do tecido adiposo e do índice de Lee no 10°ddg. No mesmo dia foi constatada grande quantidade de células uNK DBAlow, redução na marcação para perforina e aumento da incidência de células positivas para caspase 3-clivada na decídua, bem como redução significativa na expressão de perforina. Sendo assim, pode-se concluir que o consumo de dieta rica em gordura durante a gestação desencadeia, não só alterações no ambiente uterino materno, mas também promove o evento de programação fetal gerando na prole alterações muito semelhantes às observadas nas mães que consumiram a dieta.por
dc.description.abstractIt is known that obesity and the consumption of a high fat diet are related to reproductive failure and to the fetal programming event and that the immune cells present in the pregnant uterus may be involved in these events. Among the uterine immune cells, the activity of the uterine Innate Lymphoid Cells (uILC) is highlighted, especially the uNK DBA+ cells. These cells are like sentinels of the maternal-fetal interface, since they are able to recognize and respond to the most varied alterations of the maternal organism, besides having an important role in the processes of decidualization, implantation and formation of the placenta. The hypothesis of this study is that the consumption of high-fat diet (HF) during gestation can affect the uterine environment, the uNK cells biologyand promoted event of fetal programming, resulting in the alteration of uNK cells of F1 generation pregnant. Ninety females of Swiss mice mated with males of the same lineage. On the morning when the vaginal plug was detected the females were divided into 2 groups which consumed the diets from the 1st day of gestation (gd) up to the moment of euthanasia: MCD (mothers fed with control diet) and MHF (mothers fed with high-fat diet). 45 MCD and 45 MHF females were euthanized at 6th, 10th and 14th gd. It was analyzed the weight gain, adipose tissue area, gestational viability, uNK cells morphology and stereology, perforin and caspase-3 cleaved immunofluorescence, gene expression of perforin, granzyme B, Ly49A, Ly49B, interferon gamma (IFNγ), vascular endothelial growth factor α (VEGFα), tumor necrosis factor α (TNFα), Toll Like receptor 4 (TLR4), Interleukin-1β (IL-1β) Growth factor (TGF-β1), Interleukin-17a (IL-17a) and Cytokine 3 signaling suppressor (SOCS 3) in the basal decidua and analysis of uILC by flow cytometry. It was also used 12 MCD and 12 MHF animals that were fed with the diets during the whole gestation to obtain the control (F1CD) and HF (F1HL) offspring. On the 2nd postnatal day (PND) the offspring were standardized in 8 to 10 pups, the number of females always equal the number of males, and the fostering procedure was also performed. The weight gain and naso-anal length of the offspring were analyzed. After the 60th PND the females were mated with non-parental males and were euthanized at 10th gd. Pregnant females were evaluated for gestational weight gain, gestational viability, uNK cells morphology and stereology, immunofluorescence for perforin and 3-cleaved caspase, and analysis of perforin expression in the maternal decidua. The results showed that the MHF group had significant weight gain and increase of the adipose tissue area, in the decidua of these females were found a large number of uNK DBAlow cells and non-reactive perforin cells in the 3 regions of SI at 10th and 14th gd and increase in the number of 3-cleaved caspase positive cells. The gene expression showed an increase of perforin and granzyme mRNA levels and low expression of Ly49A, IFN-γ, IL-1β and IL- 17α at the 6th gd. At 14th gd there was a decrease in the expression of VEGFα, TNFα, TGF-β1 and SOCS3. In the F1HF group there was a reduction in postnatal growth and an increase in the Lee index in the 60th PND. Significant increase in weight and mean area of adipose tissue and the Lee index at 10th gd were also observed. On the same day a large number of DBAlow uNK cells, a decrease in perforin positive cells and an increase in the incidence of 3-cleaved caspase positive cells in the decidua were observed as well as a significant reduction in perforin expression. Thus, it can be concluded that consumption of a high-fat diet during pregnancy triggers not only changes in the maternal uterine environment, but also promotes the fetal programming event, generating in the offspring changes very similar to those observed in the mothers who consumed the diet.eng
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dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESpor
dc.formatapplication/pdf*
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Alfenaspor
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Biomédicaspor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.initialsUNIFAL-MGpor
dc.publisher.programPrograma Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicaspor
dc.rightsAcesso Embargadopor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/-
dc.subjectDieta Hiperlipídicapor
dc.subjectDesenvolvimento Fetalpor
dc.subjectCélula Matadoras Naturaispor
dc.subjectLinfócitospor
dc.subject.cnpqFISIOLOGIA::FISIOLOGIA DE ORGAOS E SISTEMASpor
dc.titleDieta hiperlipídica provoca alterações fenotípicas e funcionais no útero das gerações parental e F1 prenhespor
dc.typeTesepor
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