Compartilhamento |
![]() ![]() |
Use este identificador para citar ou linkar para este item:
https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1578
Tipo do documento: | Dissertação |
Título: | Avaliação in vitro e in silico da atividade esquistossomicida de derivados eugenólicos utilizando ferramentas bioquímicas, moleculares e morfológicas |
Autor: | SOUZA, Isabella Maria Monteiro de ![]() |
Primeiro orientador: | MARQUES, Marcos José |
Primeiro coorientador: | CASTRO, Aline Pereira |
Primeiro membro da banca: | BARROS, Gérsika Bitencourt Santos |
Segundo membro da banca: | SOUZA, Raquel Lopes Marns |
Resumo: | A esquistossomose é uma doença parasitária crônica causada por parasitos do gênero Schistosoma. Atualmente, a quimioterapia é o recurso imediato para minimizar a prevalência e incidência desta doença em todo o mundo, e o único medicamento indicado para o tratamento é o praziquantel (PZQ). No entanto, a dependência de um único fármaco é preocupante, principalmente em áreas endêmicas, onde a quimioterapia repetitiva é constante, podendo favorecer o aparecimento de cepas resistentes ao medicamento. Na literatura já foram relatadas algumas competências do eugenol, tais como atividades antibacterianas e antiparasitárias. Neste sentido, este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade in vitro de derivados eugenólicos sobre os vermes adultos do Schistosoma mansoni utilizando ferramentas bioquímicas e morfológicas; além da análise in silico, a fim de elucidar o mecanismo de ação destes compostos sobre o parasito. Desta forma, o uso de diferentes técnicas auxiliou a elucidar o meio pelo qual os derivados eugenólicos agiam sobre o verme. Após realização do screening com diversos derivados eugenólicos em diferentes doses, selecionou-se três compostos e determinou-se assim seu ED50, sendo, portanto, FB1 (62,19µg/ml), FB4 (41,04µg/ml) e FB9 (100,67 µg/ml). Assim, foi feita uma análise biomolecular sobre o sistema excretor e lesão de tegumento do parasito utilizando microscopia de fluorescência e eletrônica de varredura. Além disso, foram realizados ensaios bioquímicos com o verapamil e a ouabaína, antagonistas dos canais de cálcio e da bomba Na+ K+ ATPase, respectivamente. Complementarmente, foram realizadas análises in silico para avaliar a interação dos derivados em questão e estes canais. Os derivados eugenólicos provocaram lesão no tegumento e no sistema excretor dos vermes adultos de S. mansoni, fato comprovado através das sondas fluorescentes de marcação e microscopia eletrônica de varredura, principalmente o derivado FB4 na concentração 80 µg / mL. Além disso, pôde-se observar o retardamento da morte dos vermes adultos comparando presença/ausência de ouabaína, 192/72h; 192/168h associado ao FB1 e FB9, respectivamente. Por outro lado, não se viu alterações quando em contato com o antagonista do canal de cálcio, que somente inibiu a ação do PZQ. Sendo assim, um dos prováveis mecanismos de ação dos derivados eugenólicos está relacionado com a inibição do canal de sódio, o que pode estar relacionado com o que já foi descrito para os compostos eugenólicos. Foi observado que o composto que melhor interagiu com estes canais foram o FB1 e FB9, mas foram os que apresentaram maior ED50 e os de menor efeito no tegumento dos vermes adultos. De modo oposto o derivado FB4 foi o que menos interagiu no contexto in silico e o de menor ED50 e maior efeito no tegumento. Desta forma podese concluir que os derivados eugenólicos atuam sobre o parasito de forma mais ativa quando atuam no tegumento dos vermes adultos do S. mansoni. |
Abstract: | Schistosomiasis is a chronic parasitic disease caused by parasites of the genus Schistosoma. Currently, chemotherapy is the immediate resource to minimize the prevalence and incidence of this disease worldwide, and the only medication indicated for treatment is praziquantel (PZQ). However, the dependence on a single drug is worrying, especially in endemic areas, where repetitive chemotherapy is constant, which may favor the appearance of strains resistant to the drug. Some competences of eugenol have been reported in the literature, such as antibacterial and antiparasitic activities. In this sense, this work aimed to evaluate the in vitro activity of eugenolic derivatives on adult worms from Schistosoma mansoni using biochemical and morphological tools; in addition to in silico analysis, in order to elucidate the mechanism of action of these compounds on the parasite. In this way, the use of different techniques helped to elucidate the means by which the eugenolic derivatives acted on the worm. After performing screening with different eugenolic derivatives at different doses, three compounds were selected and their ED50 was thus determined, thus being FB1 (62.19µg / ml), FB4 (41.04 µg / ml) and FB9 (100, 67 µg / ml). Thus, a biomolecular analysis was performed on the excretory system and skin damage of the parasite using fluorescence microscopy and scanning electron. In addition, biochemical tests were performed with verapamil and ouabain, antagonists of the calcium channels and the Na + K + ATPase pump, respectively. In addition, in silico analyzes were carried out to evaluate the interaction of the derivatives in question and these channels. The eugenolic derivatives caused damage to the tegument and the excretory system of the adult worms of S. mansoni, a fact confirmed by the fluorescent marking probes and scanning electron microscopy, mainly the FB4 derivative at 80 µg / mL concentration. In addition, it was possible to observe the delay in the death of adult worms by comparing the presence / absence of ouabain, 192 / 72h; 192 / 168h associated with FB1 and FB9, respectively. On the other hand, no changes were seen when in contact with the calcium channel antagonist, which only inhibited the action of PZQ. Thus, one of the likely mechanisms of action of eugenolic derivatives is related to sodium channel inhibition, which may be related to what has already been described for eugenolic compounds. It was observed that the compound that best interacted with these channels were FB1 and FB9, but they were the ones that had the highest ED50 and those with the least effect on the coat of adult worms. Conversely, the FB4 derivative was the one that least interacted in the in silico context and the one with the lowest ED50 and the greatest effect on the integument. In this way, it can be concluded that the eugenolic derivatives act on the parasite more actively when they act on the integument of the adult worms of S. mansoni. |
Palavras-chave: | Schistosoma mansoni Eugenol Esquistossomose Farmacologia |
Área(s) do CNPq: | CIENCIAS BIOLOGICAS::PARASITOLOGIA |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Instituição: | Universidade Federal de Alfenas |
Sigla da instituição: | UNIFAL-MG |
Departamento: | Instituto de Ciências Exatas |
Programa: | Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas |
Citação: | SOUZA, Isabella Maria Monteiro de. Avaliação in vitro e in silico da atividade esquistossomicida de derivados eugenólicos utiliza (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2020 . |
Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
Endereço da licença: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
URI: | https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1578 |
Data de defesa: | 28-Fev-2020 |
Aparece nas coleções: | Mestrado |
Arquivos associados a este item:
Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
---|---|---|---|---|
Dissertação de Isabella Maria Monteiro de Souza.pdf | 2,18 MB | Adobe PDF | Baixar/Abrir Pré-Visualizar |
Este item está licenciada sob uma Licença Creative Commons