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https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/2597
Tipo do documento: | Tese |
Título: | Investigação dos efeitos do canabidiol e seus análogos na epilepsia: abordagens in vitro e in vivo |
Autor: | AQUINO JÚNIOR, Milton Kennedy ![]() |
Primeiro orientador: | PAULA, Fernanda Borges de Araújo |
Primeiro coorientador: | PEREIRA, Marilia Gabriella Alves Goulart |
Segundo coorientador: | SANTOS, Victor Rodrigues |
Primeiro membro da banca: | NASCIMENTO FILHO, Edson Galdino |
Segundo membro da banca: | LEITÃO, Silvia Graciela Ruginski |
Terceiro membro da banca: | PACHECO, Larissa Helena Lobo Torres |
Quarto membro da banca: | RODRIGUES, Rafaela Figueiredo |
Resumo: | A epilepsia é um distúrbio neurológico caracterizado pela ocorrência periódica de crises imprevisíveis, causadas pela hiperexcitabilidade dos neurônios cerebrais. Os efeitos adversos dos fármacos antiepilépticas tradicionais, bem como sua ineficácia em casos refratários, levaram à busca de tratamentos alternativos para a epilepsia, como o uso do Canabidiol (CBD), principal composto não psicotrópico presente na planta Cannabis spp. Acredita-se que alguns de seus análogos sejam igualmente eficazes na mitigação dos sintomas epilépticos, tornando necessários mais estudos na área para melhorar o tratamento da epilepsia. Com o objetivo de elucidar os efeitos do CBD e seus análogos na epilepsia, utilizamos diferentes abordagens e modelos experimentais in vitro e in vivo. Para os testes in vitro analisamos a viabilidade celular, a quantificação de glutamato, intra e extracelular, por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), análise da atividade elétrica neuronal e a expressão da proteína ácida fibrilar glial (GFAP). Para estudos in vivo utilizamos o modelo de indução de epilepsia por pentilenotetrazol (PTZ) em ratos Wistar com 11 dias de idade, verificando a latência e duração das crises, e em larvas de Zebrafish com 7 dias após a fertilização, verificando os parâmetros de distância, velocidade, tempo de imobilidade e rotação, assim como a expressão de c-Fos e a iterleucina-1beta. Os grupos experimentais foram comparados utilizando o One-way ANOVA (pós-teste de Tukey). No estudo in vitro por adição de glutamato 1mM, verificamos que no teste de viabilidade celular o CBD e os compostos 245 e 309 (10 µM) conseguiram reverter a perda de viabilidade provocada pelo glutamato. Ao realizarmos a quantificação de glutamato por HPLC, vimos que os compostos 291 e 309 aumentaram a captação de glutamato intracelular. Quando analisamos a atividade elétrica neuronal, observamos que o glutamato aumentou significativamente a porcentagem média de spikes/15min, enquanto o pré-tratamento de 3h e 24h com o CBD e os análogos 302 e 309 normalizaram os spikes. O CBD e o composto 302 apresentaram redução significativa na expressão de GFAP. Para os testes in vivo, o modelo em ratos Wistar não apresentou diferença entre os tratamentos. No entanto, no modelo de Zebrafish, o CBD e seus análagos demonstraram redução dos parâmetros em estudo em comparação com o grupo PTZ. A atividade neuronal avaliada pela quantificação de cFos mostrou redução significativa com CBD e análogos 302 e 309 em comparação ao grupo PTZ. Estas descobertas sugerem que os análogos do CBD são promissores como potenciais tratamentos para a epilepsia. |
Abstract: | Epilepsy is a neurological disorder characterized by the periodic occurrence of unpredictable seizures, caused by the hyperexcitability of brain neurons. The adverse effects of traditional antiepileptic drugs, as well as their ineffectiveness in refractory cases, have led to the exploration of alternative treatments for epilepsy, such as the use of Cannabidiol (CBD), the main non-psychoactive compound found in the Cannabis spp. plant. It is believed that some of its analogs may be equally effective in mitigating epileptic symptoms, necessitating further research in the field to improve epilepsy treatment. To elucidate the effects of CBD and its analogs on epilepsy, we employed various experimental approaches and models both in vitro and in vivo. For in vitro tests, we analyzed cell viability, glutamate quantification (intracellular and extracellular) by HPLC, neuronal electrical activity, and the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP). For in vivo studies, we used the pentylene tetrazole (PTZ) epilepsy induction model in 11-day-old Wistar rats, assessing seizure latency and duration, and in 7-day-old Zebrafish larvae, evaluating distance, speed, immobility time, and rotation, as well as the expression of c-Fos and interleukin-1beta. Experimental groups were compared using One-way ANOVA (Tukey's post-test). In the in vitro study with 1mM glutamate addition, we found that in the cell viability test, CBD and compounds 245 and 309 (10µM) were able to reverse the loss of viability induced by glutamate. When quantifying glutamate by HPLC, compounds 291 and 309 increased intracellular glutamate uptake. Analysis of neuronal electrical activity showed that glutamate significantly increased the average percentage of spikes/15 minutes, while pre-treatment for 3 hours and 24 hours with CBD and analogs 302 and 309 normalized the spikes. CBD and analog 302 showed a significant reduction in GFAP expression. For in vivo tests, the Wistar rat model showed no difference between treatments. However, in the Zebrafish model, CBD and its analogs demonstrated a reduction in the studied parameters compared to the PTZ group. Neuronal activity assessed by c-Fos quantification showed a significant reduction with CBD and analogs 302 and 309 compared to the PTZ group. These findings suggest that CBD analogs are promising as potential treatments for epilepsy. |
Palavras-chave: | Farmácos neuroprotetores Astrócitos Comportamento animal |
Área(s) do CNPq: | CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Instituição: | Universidade Federal de Alfenas |
Sigla da instituição: | UNIFAL-MG |
Departamento: | Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação |
Programa: | Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
Citação: | AQUINO JÚNIOR, Milton Kennedy. Investigação dos efeitos do canabidiol e seus análogos na epilepsia: abordagens in vitro e in vivo. 2024. 112 f. Tese (Doutorado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2024. |
Tipo de acesso: | Acesso Embargado |
URI: | https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/2597 |
Data de defesa: | 30-Ago-2024 |
Aparece nas coleções: | Doutorado em Ciências Farmacêuticas |
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Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
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Tese de Milton Kennedy Aquino Júnior.pdf | 4,12 MB | Adobe PDF | Baixar/Abrir Pré-Visualizar Solictar uma cópia |
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