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https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/302| Tipo do documento: | Dissertação |
| Título: | Obtenção de proantocianidinas do barbatimão e avaliação da toxicidade sobre células de tumor mamário humano MDA-MB-435 e MCF-7 |
| Autor: | SANTOS, Lívia Mara  |
| Primeiro orientador: | GOUVÊA, Cibele Marli Cação Paiva |
| Primeiro membro da banca: | FIORINI, João Evangelista |
| Segundo membro da banca: | CHAVASCO, Jorge Kleber |
| Resumo: | O objetivo deste trabalho foi isolar proantocianidinas de folhas de barbatimão e avaliar a atividade citotóxica para células de tumor mamário humano, MCF-7 (ER+) e MDA-MB-435 (ER-). As proantocianidinas foram isoladas da fração aquosa de folhas de barbatimão, utilizando-se cromatografia em coluna de Sephadex LH-20 e metanol (10-100% ) e acetona (70%) como eluentes. A presença de proantocianidinas, nas frações obtidas, foi monitorada por cromatografia de camada delgada e esta revelou que a fração eluída com metanol 100% (usada nos experimentos) apresentou o maior teor de proantocianidinas. A despolimerização ácida permitiu quantificar as procianidinas na amostra e a análise por HPLC revelou a presença de ácido gálico, procianidina dimérica B1 e (-)-epicatequina-3-O-galato. A fração apresentou atividade antioxidante, sendo que a capacidade antioxidante total foi de 470,28 ± 14,36 mg ácido ascórbico/g de fração. A atividade seqüestrante de radicais livres DPPH 50% foi de 12 μg/mL e a atividade inibidora máxima da oxidação de proteínas foi obtida com 50 μg/mL de fração. A fração apresentou atividade citotóxica para células de tumor mamário MCF-7 e MDA-MB-435. O tratamento das células com a fração aumentou a atividade redutora de MTT, o que indica aumento da viabilidade celular. Entretanto, a análise morfológica revelou intensa vacuolização citoplasmática dependente da concentração da fração. Os vacúolos acumularam MTT, indicando tratarem-se de vacúolos autofágicos. Outras alterações morfológicas observadas com o tratamento foram a perda da morfologia celular típica, condensação da cromatina (principalmente formação de núcleo picnótico), alterações na membrana plasmática e após 48 h de tratamento houve marcante diminuição do tamanho das células. Não foi observado o padrão de DNA escada característico de apoptose nos diversos tratamentos. Os resultados parecem indicar que a fração isolada pode induzir autofagia nos dois tipos celulares estudados. A autofagia pode potencializar os efeitos antitumorais de quimioterápicos, o que pode ser útil na terapia contra o câncer e as folhas de barbatimão parecem ser uma valiosa fonte de substâncias bioativas. |
| Abstract: | The aim of the present study was to isolate proanthocyanidins from barbatimão leaves and evaluate its cytotoxic activity to MCF-7 (ER+) e MDA-MB-435 (ER-) cells. The proanthocyanidins were isolated from the aqueous fraction of barbatimão leaves using Sephadex LH-20 column chromatography and methanol (10-100%) and acetone (70%) as eluents. The proanthocyanidins presence in the obtained fractions was monitored by thin layer chromatography and it revealed that the methanol 100% eluted fraction (used in the experiments) exhibited the highest content of proanthocyanidins. The acid depolimerization allowed quantifying the procyanidins in the sample and the HPLC analysis revealed the presence of gallic acid, procyanidin dimmer B1 and (-)-epicatechin-3-O-gallate. The fraction exhibited antioxidant activity, being the total antioxidant capacity 470.28 ± 14.36 mg ascorbic acid/g of fraction. The 50%DPPH free radical scavenging activity was obtained with 12 μg/ml and the maximum protein oxidation inhibitory activity was achieved with 50 μg/ml fraction. The fraction was cytotoxic to breast cancer MCF-7 and MDA-MB-435 cells. Cell fraction treatment enhanced the reducing MTT activity that indicates increased cell viability. However, the morphological analysis showed intense cytoplasmic vacuolization in a dosedependent manner. The vacuoles accumulated MTT, which seems to be consistent with autophagic vacuoles. Other morphological changes observed after cell treatment include cell lost of typical morphology, chromatin condensation (mainly pyknosis), membrane blebbing and after 48 h-treatment there was prominently cell shrinkage. No DNA-laddering formation, typical of apoptosis, was obtained after cell treatment. The results seem to indicate that the isolated fraction could induce autophagy in both studied breast cancer cell lines. Autophagy could enhance the effects of antitumor chemotherapy that can be useful in anti-cancer therapy and barbatimão leaf seems to be a valuable source of bioactive substances. |
| Palavras-chave: | Neoplasias da Mama Proantocianidinas Stryphnodendron adstringens |
| Área(s) do CNPq: | CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA |
| Idioma: | por |
| País: | Brasil |
| Instituição: | Universidade Federal de Alfenas |
| Sigla da instituição: | UNIFAL-MG |
| Departamento: | Instituto de Ciências Biomédicas |
| Programa: | Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas |
| Citação: | SANTOS, Lívia Mara. Obtenção de proantocianidinas do barbatimão e avaliação da toxicidade sobre células de tumor mamário humano MDA-MB-435 e MCF-7. 2009. 52 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2009 . |
| Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
| Endereço da licença: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
| URI: | https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/302 |
| Data de defesa: | 18-Fev-2009 |
| Aparece nas coleções: | Mestrado |
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| Dissertação Lívia Mara Santos.pdf | 396,18 kB | Adobe PDF | Baixar/Abrir Pré-Visualizar |
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