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https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/943
Tipo do documento: | Dissertação |
Título: | Avaliação de nanotubos de carbono de acesso restrito na obtenção e determinação de apoproteínas |
Autor: | GOMES, Raphael Antônio Borges ![]() |
Primeiro orientador: | MAGALHÃES, Cristiana Schmidt de |
Primeiro coorientador: | FIGUEIREDO, Eduardo Costa de |
Primeiro membro da banca: | VIRTUOSO, Luciano Sindra |
Segundo membro da banca: | PEREIRA FILHO, Edenir Rodrigues |
Resumo: | Neste trabalho, propomos o estudo dos mecanismos de adsorção de um novo material adsorvente capaz de extrair íons metálicos, obtido através da modificação química de nanotubos de carbono (CNT) com o emprego de agente oxidante ácido, seguido do revestimento com uma camada externa de albumina de soro bovino (BSA), resultando em nanotubos de carbono de acesso restrito revestidos com BSA (RACNT-BSA). Os materiais foram caracterizados por: análise termogravimétrica (TG/DTG) a fim de avaliar a estabilidade térmica, espectroscopia no infravermelho (IR) para confirmação dos grupos funcionais envolvidos nos processos oxidação dos CNT e recobrimento dos mesmos com BSA, análise elementar (CHN), microscopia eletrônica de varredura (MEV) para avaliar a morfologia e difração de raio-X. Para facilitar a compreensão dos mecanismos de interações entre os RACNT-BSA com BSA em solução e com íons metálicos, determinaram-se os pontos isoelétricos de todos os materiais. Para o estudo dos possíveis mecanismos de interação entre os RACNT-BSA e proteínas em solução, percolou-se soluções de BSA com concentração 3 μg. mL-¹ em tampão fosfato com pH no intervalo de 2,2 a 7,0 nos RACNT-BSA. Dessa maneira, verificou-se uma relação entre o processo adsortivo nos RACNT-BSA e o pI (ponto isoelétrico) das proteínas, ou seja, propomos um mecanismo para o funcionamento dos RACNT-BSA dependente do pH da solução e das proteínas a serem percoladas. Quando uma solução de proteínas é percolada através de um cartucho de SPE contendo RACNT-BSA e o pH da solução é maior do que o ponto isoelétrico das proteínas, ambas as proteínas solubilizadas e a camada de BSA são ionizadas negativamente. Assim, uma repulsão eletrostática impede a interação entre as proteínas da amostra e a superfície do RACNT-BSA. Verificou-se que os íons metálicos podem ser adsorvidos nos RACNT-BSA, porém os processos adsortivos são afetados quanto a variação do pH da solução e a escolha do tampão adequado. Também se estudou a extração dos íons Fe das estruturas das proteínas da catalase. Quanto à aplicação para a catalase, verificamos que ao mesmo tempo em que não há adsorção desta proteína nos RACNT-BSA, os íons Fe, ligados covalentemente à ela, são atraídos e adsorvidos nos RACNT-BSA, sendo necessário, porém a desnaturação proteíca. Isto nos mostrou que o material RACNT-BSA se mostrou promissor para a formação de apoproteínas. |
Abstract: | In this work, we proposed to study the adsorption mechanisms of a new adsorbent material capable of extracting metal ions, obtained by chemical modification of carbon nanotubes (CNT) with the use of oxidizing acidic agent, followed by coating with an outer layer of bovine serum albumin (BSA), resulting in restricted access of carbon nanotubes coated with BSA (RACNT-BSA). The materials were characterized by thermogravimetric analysis (TG) in order to evaluate thermal stability, infrared spectroscopy (IR) to confirm the functional groups involved in the oxidation processes of CNT and covering the same with BSA, elemental analysis (CHN), scanning electron microscopy (SEM) to evaluate the morphology and powder X-ray diffraction. To facilitate the understanding of the interaction mechanisms among RACNT-BSA and BSA in solution and metal ions, the isoelectric points (Ip) (isoelectric point) of all materials were determined. To study the possible interaction mechanisms between RACNT-BSA and solubilized proteins, the BSA solutions (3 μg. mL-¹) in phosphate buffer with a pH in the range 2.2 to 7.0 were percolated through the RACNT-BSA. Thus, there is a relationship between the adsorptive process in the RACNT-BSA and the protein Ip’s, i.e., we proposed a working mechanism for RACNT-BSA dependent on the pH solution and on the type of percolated protein. When a protein solution is percolated through a SPE cartridge containing RACNT-BSA and the pH solution is higher than the protein Ip, both solubilized protein and BSA layer (from RACNT-BSA) are negatively ionized. Therefore, an electrostatic repulsion prevents the interaction between the solubilized proteins and the surface of RACNT-BSA. It was found that metal ions can be adsorbed on RACNT-BSA, but the adsorptive processes can be affected according the changing of pH solution, and the choice of the appropriate buffer. The application to catalase protein, we found that while there is no adsorption of this protein on RACNT-BSA, the Fe ions, covalently linked to it, are attracted and adsorbed on RACNT-BSA, requiring, however, the denaturation of protein. These results showed us that the RACNT-BSA material is promising for the apoprotein’s formation. |
Palavras-chave: | Adsorção Eletrostatica Catalase Apoproteínas. |
Área(s) do CNPq: | QUIMICA::QUIMICA ANALITICA |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Instituição: | Universidade Federal de Alfenas |
Sigla da instituição: | UNIFAL-MG |
Departamento: | Instituto de Química |
Programa: | Programa de Pós-Graduação em Química |
Citação: | GOMES, Raphael Antônio Borges. Avaliação de nanotubos de carbono de acesso restrito na obtenção e determinação de apoproteínas. 2016. 95 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2016 . |
Tipo de acesso: | Acesso Aberto |
Endereço da licença: | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ |
URI: | https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/943 |
Data de defesa: | 27-Fev-2016 |
Aparece nas coleções: | Mestrado |
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Dissertação de Raphael Antônio Borges Gomes.pdf | 10,97 MB | Adobe PDF | Baixar/Abrir Pré-Visualizar |
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