@MASTERSTHESIS{ 2014:1975057671, title = {Envolvimento da defesa antioxidante de fungos na formação de biofilme}, year = {2014}, url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/293", abstract = "As espécies reativas de oxigênio/nitrogênio são produzidas por fagócitos, inicialmente, pela formação do ânion superóxido do qual se derivam outros potentes microbicidas. Em resposta ao estresse oxidativo/nitrosativo, todas as células apresentam capacidade de defesa antioxidante endógena. Fungos são capazes de modular sua defesa antioxidante aumentando sua patogenicidade frente às defesas do organismo hospedeiro. Vários dados experimentais levantam a hipótese que de que Candida albicans são fungos que aumentam sua defesa antioxidante para formação de biofilmes. Os nitróxidos são antioxidantes sintéticos que modulam a atividade do complexo NADPH oxidase (Nox2) de fagócitos, reduzindo a produção de ânions superóxido. Esse efeito dos nitróxidos diminui as ações deletérias de oxidantes durante um processo inflamatório, mas poderia comprometer a capacidade microbicida dos fagócitos. O objetivo deste trabalho foi o estudo da interação entre neutrófilos humanos e C. albicans na forma planctônica e biofilme, enfocando a defesa antioxidante enzimática como mecanismo de patogenicidade do fungo. O efeito de adição do nitróxido 4-hidroxi-2,2,6,6-tetrametilpiperidina-1-oxil (Tempol) foi testado, com o intuito de verificar se este composto altera a resistência destes microrganismos ao ataque de oxidantes produzidos por fagócitos. Foi realizado o doseamento das enzimas antioxidantes superóxido dismutases (SOD) e catalase (CAT) das leveduras e dos neutrófilos na presença e ausência do Tempol. O monitoramento do burst respiratório foi utilizado para determinar os efeitos do nitróxido sobre a atividade de Nox2 dos neutrófilos. O ensaio de killing de C. albicans por neutrófilos foi realizado cultivando-se a levedura na presença de neutrófilos previamente tratados com Tempol ou apenas com o veículo e avaliado através de contagem de unidades formadoras de colônias. Os resultados revelaram uma alta atividade das enzimas SOD e CAT no fungo, sendo maior quando em biofilme. Além disso, a levedura diminuiu a atividade enzimática antioxidante dos neutrófilos humanos, quando os mesmos foram expostos. O Tempol foi capaz de reduzir essa atividade tanto na levedura quanto nos neutrófilos. A levedura em suas formas estudadas estimulou alta atividade de Nox2 dos neutrófilos e o Tempol inibiu a mesma. Através do ensaio de killing foi detectado um crescimento menor do fungo quando na presença dos neutrófilos e um maior crescimento microbiano quando adicionado o Tempol, sugerindo um comprometimento da ação fungicida dos neutrófilos. Os resultados mostraram que, na forma de biofilme, C. albicans tem uma maior defesa frente ao sistema imune do hospedeiro, decorrente, ao menos em parte, da alta atividade das enzimas SOD e CAT, o que exige uma demanda mais elevada de espécies oxidantes para controlar o foco infeccioso. A presença de um antioxidante sintético provocou diminuição da concentração destas espécies oxidantes, o que pode ser deletério no controle da infecção.", publisher = {Universidade Federal de Alfenas}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas}, note = {Instituto de Ciências Biomédicas} }