@MASTERSTHESIS{ 2012:2077978887, title = {Detecção e caracterização de determinantes de resistência aos antibióticos ß-lactâmicos e quinolonas em bactérias Gram-negativas isoladas de amostras clínicas}, year = {2012}, url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/306", abstract = "O presente trabalho teve como principal objetivo a detecção e caracterização dos genes plasmideais de resistência às quinolonas qnr, aac(6’)-Ib-cr e qepA, , e ainda, os genes blaTEM, blaSHV e blaCTX-M, codificadores de -lactamases de espectro estendido (ESBL) em coleções de enterobactérias isoladas a partir de amostras clínicas obtidas em dois hospitais do estado de Minas Gerais. No período de junho a outubro de 2010, foram isoladas 873 enterobactérias das quais 106 (12%) foram triadas para este estudo por apresentarem diminuição de sensibilidade ao ácido nalidíxico. A identificação bacteriana foi realizada através de testes bioquímicos convencionais e pelo sistema automatizado MicroScan - autoSCAN®-4. O perfil de sensibilidade aos antimicrobianos foi determinado pelo método de disco difusão e a concentração inibitória mínima foi determinada por microdiluição em caldo, como descrito e recomendado pelo “Clinical Laboratory Standards Institute - CLSI”, para os isolados produtores do gene qnr e seus respectivos transconjugantes. A detecção dos genes associados aos mecanismos de resistência estudados e a análise das mutações presentes nos genes cromossômicos gyrA e parC foram realizadas por PCR e sequenciamento. A extração de plasmídeos das bactérias e seus transconjugantes, contendo os determinantes qnr, foi realizada segundo a técnica de Kieser. Os resultados obtidos pela eletroforese em campo pulsado foram interpretados segundo os critérios estabelecidos por Tenover et al., 1995. A coleção bacteriana foi composta por: Escherichia coli (n=61; 57,6%), Enterobacter cloacae (n=23; 21,7%), Klebsiella pneumoniae (n=16; 15,1%), Proteus mirabilis (n=3; 2,8%), Serratia marcescens (n=2; 1,9%) e Proteus vulgaris (n=1; 0,9%). A maioria das enterobactérias (82%) foi isolada de infecções do trato urinário seguido de hemoculturas, swab de secreções, aspirado traqueal e ponta de cateter. De acordo com os critérios do CLSI, 94% (n=100) das enterobactérias foram resistentes ao ácido nalidíxico, 71% (n=75) foram resistentes à ciprofloxacina e 76% (n=81) apresentaram diminuição de sensibilidade a ceftazidima e/ou cefotaxima. A pesquisa de qnr resultou na detecção dos genes qnrB e qnrS em treze isolados, incluindo E. cloacae (n=6), K. pneumoniae (n=5) e E. coli (n=2). O gene qnrB1 foi o mais prevalente, seguido de qnrS1, qnrB2 e qnrB19. Nas amostras qnr positivas, foram detectados 4 isolados positivos para o gene aac(6’)-Ib-cr, 6 isolados para blaSHV, 11 isolados para blaCTX-M e 11 isolados para o gene blaTEM. O determinante qepA não foi detectado. Este trabalho indica a disseminação de mecanismos de resistência às quinolonas mediados por plasmídeos (PMQR) em amostras clínicas no Brasil. A coexistência de genes ESBL e PMQR demonstra a complexidade dos plasmídeos carreando determinantes de resistência entre os membros da família Enterobacteriaceae.", publisher = {Universidade Federal de Alfenas}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas}, note = {Faculdade de Ciências Farmacêuticas} }