@MASTERSTHESIS{ 2020:2103334502, title = {Equilíbrio, análise conformacional e atividade biológica de hemoglobina complexada a dopamina}, year = {2020}, url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1567", abstract = "A hemoglobina é a principal proteína no transporte de O2 em vertebrados. Nos últimos anos, estudos tem relatado sua expressão em locais atípicos como em células produtoras de dopamina, neurotransmissor responsável por diversas funções, incluindo a regulação do movimento na substancia negra do encéfalo, sua degeneração seletiva leva à doença de Parkinson sendo o segundo distúrbio neurodegenerativo mais comum que afeta 2 a 3% da população mundial com mais de 65 anos de idade e 3,3 % no Brasil. Neste sentido, este trabalho teve por objetivo estudar o equilíbrio de interação da dopamina com a hemoglobina e seu possível efeito na resposta biológica desta proteína. Para isto foram realizados ensaios visando compreender e caracterizar termodinamica e conformacionalmente a interação por espectrofotometria uv-vis, espectrofluorimetria e voltametria cíclica. A formação do complexo foi confirmada pelas três técnicas, revelando um valor médio para Kd de 273,7 Mol.L-1. Análise por Benesi-Hildebrand, Scatchard, Maitra e Hill confirmaram a formação do complexo Hemoglobina-Dopamina na proporção 1:1, também descartando fenômenos de homocooperatividade ou heterogeneidade dos 2 sítios de ligação encontrados para cada monômero proteico. Demais parâmetros termodinâmicos obtidos por fluorimetria apresentaram valores de G° = -15,7 kJ mol-1 a 25°C, H° +8,8 kJ mol-1 e S° +82,2 J mol-1 K-1. Isso sugere que a formação do complexo fora espontânea e com modo entropicamente dirigido como predominante, o que foi reforçado pela baixa contribuição de interações iônicas e pontes salinas em ensaios com variação de pH e NaCl. Complementarmente, alterações conformacionais significativas induzidas por DA na Hb foram descartadas por ensaios com sonda hidrofóbica ANS, embora a formação do complexo sugira influenciar negativamente no Tm de Hb. A dopamina apresentou um efeito negativo na atividade peroxidásica de Hb junto a H2O2 ao, sugerindo que essa interação possa ter impacto nos mecanismos celulares de estresse oxidativo em neurônios dopaminérgicos que expressam Hb.", publisher = {Universidade Federal de Alfenas}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Química}, note = {Instituto de Química} }