@MASTERSTHESIS{ 2021:1262031520,
 	title = {Desenvolvimento de uma estratégia de avaliação in vitro aplicável à   verificação do potencial anti- Trypanosoma cruzi de candidatos a   fármacos},
 	year = {2021},
 	url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1796",
 	abstract = "A falha terapêutica observada nos estudos clínicos com os candidatos a fármacos
 tripanossomicidas mais promissores até então estudados evidenciaram a
 necessidade de maior compreensão sobre os fatores que interferem na seleção e
 análise de novos candidatos a fármacos para a doença de Chagas. No entanto, o valor
 translacional das estratégias de screening no âmbito da experimentação in vitro tem
 sido pouco explorado. Neste sentido, os objetivos do presente estudo são avaliar a
 influência do tipo celular hospedeiro na atividade anti- T. cruzi de fármacos e subsidiar
 a padronização de uma estratégia in vitro de alto valor translacional para identificação
 do potencial terapêutico de novas moléculas. Foram utilizadas duas linhagens
 celulares, Vero e H9c2, infectadas pela cepa Y de T. cruzi, incubadas ou não com
 fármacos de reconhecida ação tripanossomicida in vitro e in vivo, o benznidazol,
 
 medicamento de referência, e os candidatos, avaliados em estudos clínicos, fex-
 sulfona, ravuconazol e posaconazol. Este modelo foi utilizado primeiramente para
 
 determinação dos valores de EC-50 e EC-90 dos fármacos comparativamente nos
 dois tipos celulares em ensaios de 48 horas utilizando placas de 24 poços.
 Posteriormente, foi desenvolvido um ensaio em placas para verificar a supressão e a
 recrudescência do parasitismo após tratamento prolongado in vitro. Para
 padronização dessa estratégia foram utilizados os mesmos modelos celulares e
 fármacos, no entanto, as células foram mantidas em placas de 90mm e tratadas por
 7 dias, quando foram submetidas ao washout. As placas foram avaliadas diariamente
 por microscopia óptica até 12 dias após o tratamento para detecção da recrudescência
 do parasitismo. Após esse período as células foram coletadas para a determinação
 da carga parasitária por qPCR. Os resultados obtidos sugerem que a atividade dos
 fármacos é influenciada pelo tipo celular, sendo os valores de EC-50 no mínimo duas
 vezes menor para a linhagem Vero. Esse perfil foi confirmado no ensaio de placas, no
 qual foi possível detectar supressão do parasitismo durante o tratamento com todos
 os fármacos e recrudescência após o tratamento com nitroimidazólicos em ambos os
 tipos celulares. No entanto, a recrudescência em H9c2 ocorreu anteriormente, e a
 carga parasitária detectada por qPCR pós-incubação com os nitroimidazólicos e
 ravuconazol foi significativamente menor nas células Vero. Os resultados obtidos
 sugerem que o tipo celular hospedeiro influencia na reposta do parasito aos fármacos
 e permitiram a identificação de uma estratégia in vitro aplicável à seleção de
 candidatos ao tratamento da doença de Chagas antes da progressão para estudos
 pré-clínicos in vivo.",
 	publisher = {Universidade Federal de Alfenas},
 	scholl = {Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas},
 	note = {Instituto de Ciências da Natureza}
}