@MASTERSTHESIS{ 2021:1773000604, title = {Avaliação in vitro da capacidade de diferenciação osteogênica de células-tronco de dentes decíduos esfoliados humanos cultivadas em grânulos de hidroxiapatita e beta-tricálcio fosfato.}, year = {2021}, url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1847", abstract = "Limitações substanciais presentes no emprego do enxerto ósseo autólogo apontam para a necessidade do estabelecimento de alternativas concretas no contexto das cirurgias reconstrutivas ósseas. A biocerâmica de fosfato de cálcio bifásico (BCP), em suas diversas proporções de hidroxiapatita (HA) e β-tricálcio fosfato (β-TCP), vem sendo lançada como uma possibilidade peremptória para esta demanda. Nesse âmbito, o presente estudo teve como propósito investigar a resposta osteogênica in vitro de células-tronco de dentes decíduos esfoliados humanos (SHED) em associação a grânulos de BCP com diferentes proporções de HA e β-TCP. Para isso, as SHED foram cultivadas por 1, 7, 14 e 21 dias em oito agrupamentos distintos, de acordo com as proporções de HA/β-TCP dos grânulos de BCP e com os meios de cultura empregados: MC80-20 (SHED + HA/β-TCP 80/20 em meio convencional - MC); MC60-40 (SHED + HA/β-TCP 60/40 em MC); MC20-80 (SHED + HA/β-TCP 20/80 em MC); MO80-20 (SHED + HA/β-TCP 80/20 em meio osteogênico - MO); MO60-40 (SHED + HA/β-TCP 60/40 em MO); MO20-80 (SHED + HA/β-TCP 20/80 em MO); C- (SHED em MC) e C+ (SHED em MO). A viabilidade e proliferação das SHED foram avaliadas por meio do ensaio MTT. A análise quantitativa e qualitativa da deposição de íons cálcio na matriz mineralizada das SHED foi conduzida empregando o ensaio colorimétrico com vermelho de alizarina. Já a expressão gênica para os marcadores de diferenciação osteogênica, OCN e RUNX2, foi avaliada pela RT-PCR em tempo real. A viabilidade e proliferação das SHED não foram afetadas pela presença dos grânulos, exceto no dia 1, cujos resultados foram menores em relação aos demais períodos. Nenhuma das proporções de HA/β-TCP dos grânulos exerceu influência superior no processo de deposição mineral, em relação às demais empregadas. Além disso, o meio osteogênico, por si só, demonstrou induzir mineralização semelhante àquela gerada em associação aos grânulos, a partir do 14o dia. Já para os marcadores de diferenciação osteogênica, foi possível perceber que alguns grupos contendo grânulos expressaram OCN, tardiamente, no 21a dia, sem diferença estatística entre aqueles que o fizeram (p>0,05). Em contrapartida, a expressão para RUNX2 se iniciou precocemente no 1o dia, em todos os grupos, sem diferença estatística entre eles (p>0,05), seguida de decaimento nos dias 7 e 14 e posterior aumento no 21o dia, em alguns grupos. Além disso, no 21o dia, o grupo C+ demonstrou maior expressão de RUNX2 que os demais grupos. Diante desses dados e considerando as limitações do estudo, concluímos que as BCPs foram capazes de estimular a diferenciação osteogênica nas SHED, sem diferença entre as três proporções empregadas.", publisher = {Universidade Federal de Alfenas}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Odontológicas}, note = {Faculdade de Odontologia} }