@PHDTHESIS{ 2017:1675958959, title = {Expressão gênica de Candida albicans frente a diferentes concentrações de antifúngicos e antiretrovirais}, year = {2017}, url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1296", abstract = "Importantes atributos associados à virulência podem ser observados em Candida spp., tais como a expressão de genes SAP, os quais são responsáveis por regular a secreção de aspartato proteases (Sapp). Sabe-se que a exposição de Candida spp. a certas substâncias pode alterar o padrão de secreção de enzimas hidrolíticas tais como as Sapp. Essas proteases apresentam estrutura química e sítio ativo semelhante às proteases do vírus HIV, o que sugere que inibidores de proteases usados no tratamento da AIDS possam interagir com as proteases de Candida spp. e influenciar a síntese das proteases. O isolado padrão de C. albicans SC5314 e dois isolados de C. albicans provenientes de casos de infecção hospitalar, classificados como sensíveis ao fluconazol e anfotericina B no teste de sensibilidade, foram cultivados por 24 horas, 37°C, 180 rpm em caldo “Yeast Carbon Base” (YCB) suplementado com soroalbumina bovina (BSA) em diferentes condições de exposição, como a presença de fluconazol e anfotericina B em concentrações inibitórias e subinibitórias e saquinavir e pepstatina A em concentrações efetivas e subefetivas. Avaliou-se a expressão relativa dos genes SAP2, SAP4, SAP7 e SAP9 nos isolados submetidos a esses cultivos usando ACT1 como gene normalizador e os resultados foram analisados pelo método do CT comparativo (2-ΔΔCT) usando a amostra não tratada como controle. A expressão de SAP nos isolados de C. albicans foi maior na presença de concentrações inibitórias/efetivas dos antifúngicos e inibidores de proteases, sendo que, em número absolutos, a expressão desses genes foi ainda maior para os inibidores de proteases. C. albicans SC5314 foi o isolado de maior expressão de SAP e SAP7 foi o gene mais expresso nos isolados, em números absolutos. A fim de investigar a influência das substâncias ativas fez-se avaliação dos cultivos por citometria de fluxo e quantificação de ergosterol. A avaliação por citometria de fluxo não demonstrou grandes alterações de complexidade celular ou desvio de fluorescência indicativo de maior atividade de morte e a quantificação do ergosterol foi significativamente reduzida em relação ao controle apenas na presença de concentração inibitória de fluconazol. Tais resultados sugerem que não deva existir relação direta entre a influência dos antifúngicos e inibidores de proteases sobre a expressão de SAP e os padrões celulares avaliados, entretanto, uma vez que os fatores associados à virulência são correlacionados, tais situações podem influenciar positivamente a expressão dos genes no sentido de promover reposição das proteases a fim de garantir sua patogenicidade.", publisher = {Universidade Federal de Alfenas}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas}, note = {Faculdade de Ciências Farmacêuticas} }