@MASTERSTHESIS{ 2007:1265735001,
 	title = {Pesquisa de pátogenos oportunistas em medicamentos tópicos: padronização e análise comparativa de metodologias},
 	year = {2007},
 	url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/745",
 	abstract = "Com a ampla disseminação da AIDS, uma grande gama de microrganismos
 tem aparecido como patógenos emergentes, causando importantes infecções em
 pacientes imunocomprometidos. Por exemplo, Rhodococcus equi, um agente incomum
 de infecções em humanos, tem sido isolado em pacientes imunocomprometidos. A
 presença deste microrganismo oportunista em produtos farmacêuticos não tem tido
 considerável atenção. No presente trabalho, o método de reação em cadeia da
 polimerase (PCR) foi comparado com métodos convencionais para rápida detecção de
 três espécies bacterianas em amostras de cremes tópicos contaminadas artificialmente.
 As amostras foram incubadas por 24 horas a 37ºC. Depois da incubação em caldo com
 10% de tween 20, amostras foram semeadas em meio para crescimento seletivo.
 Identificação bioquímica de Bacillus cereus e Rhodococus equi foram feitas utilizando o
 sistemas de identificação API 20E® e API Coryne®, respectivamente. Para identificação
 de Micrococcus luteus foram utilizados os testes de catalase, oxidase, morfologias das
 colônias e o sistema Gram. O DNA foi extraído usando o método do fenol-clorofórmio.
 Os iniciadores utilizados contendo a seqüência específica foram para B. cereus (BC1 e
 BC2), R. equi (COX-F e COX-R) e para M. luteus (ML-ISR-R e ML-ISR-F) foram
 utilizados na reação de PCR. Para validação da metodologia molecular, as seqüências
 dos produtos de PCR foram determinadas e analizadas utilizando-se os programas
 Blastn e Blastx. Foi observado uma alta similaridade (E .value   0,0) e uma alta
 identidade ( > 99%) para as bactérias utilizadas neste estudo. Os métodos convencional
 e de PCR detectaram B. cereus, R. equi e M. luteus em todas as amostras
 contaminadas artificialmente. O tempo para completar o método de PCR incluindo o
 preparo de amostras e a amplificação específica do DNA bacteriano foi de 27 horas.
 Para o método convencional foi necessário de 72 a 96 horas para o isolamento e
 identificação bioquímica dos microrganismos pesquisados. A rápida detecção de PCR
 para B. cereus, R. equi e M. luteus mostrada neste trabalho sugerem o uso desta
 metodologia em controle de qualidade microbiológica de produtos tópicos não estéreis,
 especialmente utilizados por pacientes imunocomprometidos.",
 	publisher = {Universidade Federal de Alfenas},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas},
 	note = {Faculdade de Ciências Farmacêuticas}
}