@MASTERSTHESIS{ 2007:39965127,
 	title = {Caracterização de isolados de Candida spp de cavidade bucal quanto aos aspectos fenótípicos e moleculares e obtenção de mutantes heteroresistentes à antotericina B e fluconazol},
 	year = {2007},
 	url = "https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/750",
 	abstract = "Nos últimos anos o aumento na incidência de candidose superficial e invasiva causada por
 espécies emergentes resistentes tem sido atribuído a disseminação do uso de antibióticos e
 agentes imunossupressores. O aumento de Candida não-albicans deve-se ao incremento de
 pacientes imunodeprimidos, neutropênicos, recém nascidos de baixo peso, procedimentos
 invasivos e iatrogenia. Todos esses fatores permitem que agentes pouco virulentos, causem
 doenças. Vários estudos bioquímicos e moleculares foram realizados no sentido de elucidar as
 causas da resistência a antifúngicos em leveduras. Os objetivos do presente estudo foram:
 estudar leveduras do gênero Candida isoladas da cavidade bucal de pacientes com e sem HIV;
 comparação de métodos de identificação dos isolados; determinar o perfil de sensibilidade aos
 antifúngicos anfotericina B e fluconazol pelas metodologias de microdiluição CLSI, AFSTEUCAST
 e difusão em agar Etest e obter amostras heterorresistentes à anfotericina B e ao
 fluconazol por indução e seleção. Foram identificados 22 isolados de C. albicans, 3 de C.
 tropicalis, 3 de C. parapsilosis e 2 de C. glabrata segundo o método clássico. A identificação
 por métodos morfológicos e bioquímicos foi 100% concordante com o método molecular
 (PCR), tanto pela amplificação dos primers espécies-específicos (C. albicans e C.
 dubliniensis) quanto pela comparação do tamanho do fragmento amplificado pelos primers da
 região ITS2. A correlação entre a metodologia Etest e os dois métodos de microdiluição foi
 alta. Todas as amostras selvagens foram sensíveis a anfotericina B (CIM£2,0μg/mL) e apenas
 um isolado (3,33%) de C. tropicalis foi resistente ao fluconazol (CIM³64,0μg/mL por CLSI e
 CIM³64,0μg/mL por AFST-EUCAST). Foram selecionadas amostras heteroresistentes
 através da pressão seletiva utilizando meio adicionado de fluconazol (8μg/mL) e em seguida
 com anfotericina B (1,0μg/mL). A pressão seletiva também foi feita iniciando-se com
 anfotericina B e em seguida fluconazol. Paralelamente, as amostras selvagens foram
 submetidas à indução de resistência através do cultivo primeiro em concentrações crescentes
 de fluconazol (16,0; 32,0; 64,0; 128 e 256mg/mL) e em seguida com anfotericina B (0,5; 1,0;
 1,5; 2,0; 2,5 e 3,0mg/mL). Os testes também foram feitos invertendo-se os antifúngicos,
 iniciando com anfotericina B e depois fluconazol. Foram obtidas três amostras
 heterorresistentes a fluconazol, das quais duas foram por indução (C. glabrata e C. tropicalis)
 e uma por seleção (C. tropicalis.). Ambas amostras de C. tropicalis foram originadas de um
 mesmo isolado selvagem. Nenhuma amostra mudou seu perfil de sensibilidade para
 anfotericina B, apesar de alguns isolados apresentarem capacidade de crescimento em várias
 concentrações deste antifúngico (1,0 a 3,0μg/mL). Após cultivos sucessivos em meio livre de
 droga, somente a cepa obtida por seleção manteve seu fenótipo de resistência. As cepas
 selvagens e suas mutantes apresentaram o mesmo perfil quando comparadas pela amplificação
 da região ITS2. Conclui-se que, embora a maior parte das espécies estudadas seja C. albicans
 (73,33%) todas as amostras heteroresistentes ao fluconazol obtidas foram Candida nãoalbicans
 (10%). As duas cepas mutantes obtidas pelo mesmo isolado inicial possuem,
 possivelmente, mecanismos múltiplos e distintos de resistência que, associado ao isolado,
 conferem resistência e/ou adaptabilidade à levedura frente ao antifúngico.",
 	publisher = {Universidade Federal de Alfenas},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas},
 	note = {Faculdade de Ciências Farmacêuticas}
}