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Tipo do documento: Dissertação
Título: Epitope-based vaccine of a Brucella abortus putative small RNA target induces protection and less tissue damage in mice
Autor: OLIVEIRA, Karen Cristina 
Primeiro orientador: ALMEIDA, Leonardo Augusto de
Primeiro membro da banca: MACEDO, Gilson Costa
Segundo membro da banca: COLOMBO, Fábio Antônio
Resumo: Brucella abortus é uma bactéria intracelular Gram-negativa que causa uma doença zoonótica chamada brucelose. Emboras as vacinas atualmente disponíveis para a imunização animal possuam potencial imunogênico, essas ainda apresentam muitas desvantagens, causando abortos de grande proporção em fêmeas prenhas e febre ondulante em humanos. Neste contexto, a recente tendência no projeto de novas vacinas contra brucelose, têm se baseado na estratégia de predição de epítopos imunogênicos selecionados por vacinologia reversa. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi identificar e avaliar a imunogenecidade de um epítopo vacinal alvo de putativos pequenos RNAs de B. abortus mediante a infecção desta bactéria em modelo murino. Foi demonstrado nesse trabalho que pequenos RNAs de B. abortus são expressos durante a infecção precoce de macrófagos derivados da medula óssea (BMDMs), sendo identificado uma apolipoproteína N-aciltransferase (Int) como o putativo alvo de maior expressão dos pequenos RNAs. Visto que a apoliproteína N-aciltransferase apresenta diminuição da sua expressão em modelo de BMDMs infectados, um epítopo desta proteína foi racionalmente selecionado por imunoinformática e explorado como candidato a vacinação contra brucelose. Camundongos C57BL/6 imunizados e desafiados com B. abortus mostraram menor recuperação no número de bactérias viáveis no fígado, baço e linfonodo axilar quando comparados a camundongos não vacinados. Os camundongos vacinados e infectados apresentaram aumento na expressão de TNF-α , IFN-γ e IL-6, seguido do também aumento na expressão dos genes anti-inflamatórios IL-10 e TGF-β no fígado, justificando a redução no número e tamanho dos granulomas observados. BMDMs estimulados com sobrenadante de esplenócitos de camundongos vacinados e infectados apresentaram marcação para CD86+ mais intensa que os demais estímulos, além de expressarem maior quantidade de iNOS e consequente aumento na produção de NO, sugerindo aumento na capacidade fagocítica e microbicida dessas células em eliminar a bactéria. Em conjunto, os resultados demonstraram que o peptídeo vacinal foi capaz de estimular uma resposta imune protetora em organismos infectados com características sugestivas de predominência do perfil Th1.
Abstract: Brucella abortusis a Gram-negative intracellular bacterium that causes a zoonotic disease called brucellosis. Although currently available vaccines for animal immunization have immunogenic potential, they still have many disadvantages, causing large-scale abortions in pregnant females and undulating fever in humans. In this context, the recent trend in the design of new vaccines against brucellosis has been based on the strategy of prediction of immunogenic epitopes selected by reverse vaccinology. Therefore, this study aimed to identify and evaluate the immunogenicity of a target vaccine epitope of putative small RNAs of B. abortus upon infection of this bacterium in a murine model. It was demonstrated in this work that small RNAs of B. abortus are expressed during the early infection of bone marrow-derived macrophages (BMDMs), and an apolipoprotein N- acyltransferase (Int) was identified as the putative target of higher expression of small RNAs. Since the apolipoprotein N-acyltransferase has decreased expression in a model of infected BMDMs, an epitope of this protein was rationally selected by immunoinformatics and explored as a candidate for vaccination against brucellosis. C57BL/6 mice immunized and challenged with B. abortus showed lower recovery in the number of viable bacteria in the liver, spleen, and axillary lymph node when compared to non-vaccinated mice. The vaccinated and infected mice showed an increase in the expression of TNF-α, IFN-γ, and IL-6, followed by an increase in the expression of the anti-inflammatory genes IL-10 and TGF-β in the liver, justifying the reduction in number and size of the observed granulomas. BMDMs stimulated with supernatant from splenocytes from vaccinated and infected mice showed more intense CD86+ marking than the other stimuli, in addition to expressing a greater amount of iNOS and consequent increase in NO production, suggesting an increase in the phagocytic and microbicidal capacity of these cells to eliminate the bacteria. Together, the results demonstrated that the vaccine peptide was able to stimulate a protective immune response in infected organisms with characteristics suggestive of a predominance of the Th1 profile.
Palavras-chave: Brucella abortus
Vacina
Resposta imune
Vacinologia reversa
Brucelose
Apolipoproteína N-aciltransferase.
Área(s) do CNPq: CIENCIAS BIOLOGICAS
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Federal de Alfenas
Sigla da instituição: UNIFAL-MG
Departamento: Instituto de Ciências da Natureza
Programa: Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas
Citação: OLIVEIRA, Karen Cristina. Epitope-based vaccine of a Brucella abortus putative small RNA target induces protection and less tissue damage in mice. 2021. [51] f. Dissertação (Ciências Biológicas em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2021.
Tipo de acesso: Acesso Embargado
Endereço da licença: http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
URI: https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/1885
Data de defesa: 23-Set-2021
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